快速膠原酶活性檢測(cè)試劑盒免疫細(xì)胞組織
簡(jiǎn)要描述:
快速膠原酶活性檢測(cè)試劑盒免疫細(xì)胞組織 含有測(cè)定膠原酶活性的所有必要成分包括重組人MMP-8(用作對(duì)照)和兩種類型的膠原酶活化劑。不同于抗體為基礎(chǔ)的ELISA試劑盒僅能檢測(cè)酶蛋白的存在,這些試劑盒目的在于測(cè)定酶活性。試劑盒使用FITC標(biāo)記的可溶性牛I型膠原或II型膠原為底物,只需2h就能完成測(cè)試。
產(chǎn)品時(shí)間:2024-03-26
Chondrex 快速膠原酶活性檢測(cè)試劑盒(Collagenase Assay Kits)
背景描述:
膠原酶(Collagenases),基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)家族的成員之一,屬于內(nèi)肽酶類,在三螺旋區(qū)降解天然膠原,參與結(jié)蹄組織的生理和病理周轉(zhuǎn)過(guò)程。膠原是動(dòng)物基質(zhì)結(jié)蹄組織的主要纖維成分。膠原酶可能在腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的多個(gè)階段中,對(duì)腫瘤細(xì)胞侵襲穿透細(xì)胞外基質(zhì)的過(guò)程起到促進(jìn)作用。膠原酶已被支持用于臨床治療杜普征氏掌攣縮(Dupuytren's contracture),佩羅尼氏?。?/span>Peyronie's disease )和傷口愈合。
膠原酶活性檢測(cè)方法很多,傳統(tǒng)的方法包括膠原酶譜法(Collagen Zymography),該法首先將樣本加入含膠原的SDS-PAGE凝膠中電泳,然后在適當(dāng)緩沖液中復(fù)性12-16h,zui后染色。當(dāng)?shù)孜锉幻附到?,在整個(gè)黑色的背景中能看到清晰透明的降解條帶,從而來(lái)判斷是否存在膠原酶活性。該方法不僅費(fèi)力費(fèi)時(shí),且很可能因復(fù)性不*逆轉(zhuǎn),導(dǎo)致酶活性降低,結(jié)果出現(xiàn)較大偏差。
Rapid Collagenase Assay Kit (I) and (II)(Chondrex, Inc)
1. 試劑盒優(yōu)勢(shì)
含有測(cè)定膠原酶活性的所有必要成分包括重組人MMP-8(用作對(duì)照)和兩種類型的膠原酶活化劑。
不同于抗體為基礎(chǔ)的ELISA試劑盒僅能檢測(cè)酶蛋白的存在,這些試劑盒目的在于測(cè)定酶活性。
試劑盒使用FITC標(biāo)記的可溶性牛I型膠原或II型膠原為底物,只需2h就能完成測(cè)試。
比底物凝膠分析法(酶譜法)快10倍,檢測(cè)靈敏度比放射同位素標(biāo)記膠原法更靈敏。
2. 特異性
哺乳動(dòng)物膠原酶
3. 工作原理
哺乳動(dòng)物膠原酶切割膠原分子上的所有三個(gè)α鏈,產(chǎn)生3/4和1/4大小的膠原片段,TCA和 TCB,這兩個(gè)片段的變性溫度分別為34-35℃和28-29℃,而所有完整膠原(天然膠原)的變性溫度是40℃。因此,35℃下這些切割片段能選擇性變性為隨機(jī)的螺旋構(gòu)象,能夠被一種有機(jī)溶劑提取出來(lái)。為了縮短變性過(guò)程(通常需60min),一種蛋白酶被引入用來(lái)進(jìn)一步消化膠原酶降解后的產(chǎn)物。
4. 反應(yīng)步驟
5. 試劑盒組分
組分名稱 | 數(shù)量 | 規(guī)格 | 保存 |
Reference-recombinant Human MMP-8 | 1 vial | 25µl, 100 units/ml | -80℃ |
Solution A-FITC-Collagen Dilution buffer | 1 bottle | 10ml | 4℃ |
Solution B-Sample dilution and reaction buffer | 1 bottle | 50ml | 4℃ |
FITC-collagen | 1 bottle | 10ml, 1mg/ml in 0.01M acetic acid | -20℃ |
Activator 1-20X APMA | 1 vial | 1ml | RT |
Activator 2-Trypsin | 1 vial | 1mg lyophilized | -20℃ |
Proteinase Inhibitor | 1 vial | 3mg lyophilized | -20℃ |
Enhancer-Elastase | 1 vial | 1mg lyophilized | -20℃ |
Stop solution-o-phenanthroline | 1 vial | 1ml 10mM in ethanol | RT |
Extraction buffer | 2 bottles | 25ml | RT |
ELISA plate black | 2 each | 96 well | RT |
6.試劑盒訂購(gòu):Chondrex原裝好貨,咨詢,,:。
貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 | 目錄價(jià)(元) |
3014 | Bacterial Collagenase Assay Kit | 100 assays | 5888 |
3001 | Rapid Collagenase Assay Kit with Type I Collagen Substrate | 100 assays | 6944 |
3002 | Rapid Collagenase Assay Kit with Type II Collagen Substrate | 100 assays | 7472 |
3003 | MMP-13 Inhibitor Assay Kit | 100 assays | 8160 |
3001 3002 Rapid Collagenase Assay Kit with Type I Collagen Substrate User Manual
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作,主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本,以誠(chéng)為信、合同守信"的經(jīng)營(yíng)理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
快速膠原酶活性檢測(cè)試劑盒免疫細(xì)胞組織
快速膠原酶活性檢測(cè)試劑盒免疫細(xì)胞組織