DiI (DiIC₁₈(3)) 細(xì)胞膜橙紅色熒光探/神經(jīng)元示蹤研究

溫馨提示：見(jiàn)細(xì)胞膜熒光探針專(zhuān)題，選擇你想要的適膜標(biāo)記探針。

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細(xì)胞膜熒光探針，DiI，DiO，DiD，DiR，DiA，CM-DiI，神經(jīng)示蹤，傳統(tǒng)細(xì)胞膜熒光探針

訂購(gòu)信息：

產(chǎn)品描述：

DiI, DiO, DiD和DiR作為一類(lèi)長(zhǎng)鏈的親脂性二烷基碳菁類(lèi)染料（Dialkylcarbocyanines）熒光染料家族，用于標(biāo)記細(xì)胞膜以及其他脂溶性生物結(jié)構(gòu)。作為一類(lèi)環(huán)境敏感型熒光染料，當(dāng)它們與膜結(jié)合或者與親脂性生物分子（例如蛋白質(zhì)，雖然在水中其熒光強(qiáng)度很弱）結(jié)合時(shí)，其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)。一旦進(jìn)入細(xì)胞后，它們?cè)诩?xì)胞內(nèi)質(zhì)膜中逐步擴(kuò)散，于家濃度條件下可將整個(gè)細(xì)胞均勻染色。這些染料具很高的淬滅系數(shù)，偏光依賴(lài)性和很短的激發(fā)壽命。

四種染料呈現(xiàn)不同的熒光顏色，DiI（橙色熒光）、DiO（綠色熒光）、DiD（紅色熒光）、DiR（深紅色熒光），為活細(xì)胞多色彩熒光成像分析和流式細(xì)胞術(shù)提供了一種便捷的工具。DiO和DiI分別用標(biāo)準(zhǔn)FITC和TRITC濾光器檢測(cè)，可結(jié)合使用。其中，DiI及其衍生物由于極其低的細(xì)胞毒性，應(yīng)用為廣泛。不僅普遍用于活體和固定組織及細(xì)胞的神經(jīng)元逆行性和順行性示蹤分析，還可以用于檢測(cè)細(xì)胞的融合和粘附，檢測(cè)發(fā)育或移植過(guò)程的細(xì)胞遷移，通過(guò)FRAP（熒光光漂白恢復(fù)技術(shù)）檢測(cè)脂質(zhì)在細(xì)胞膜上的擴(kuò)散過(guò)程，檢測(cè)細(xì)胞毒性，以及標(biāo)記脂蛋白如LDL和HDL等。

本品以DiI的高氯酸鹽形式提供，英文全名：1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethylindocarbocyanine perchlorate，CAS NO.41085-99-8，純度≥98%（TLC），適用于熒光檢測(cè)研究。

基本特性：

1）同義名：DiI perchlorate; DiIC18(3); 1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethylindocarbocyanine perchlorate;

2）CAS NO：41085-99-8

3）分子式：C59H97ClN2O4

4）分子量：933.87g/mol

5）純度：≥98%（TLC）

6）溶解性：溶于DMF，DMSO，甲醇

7）外觀：紅色至暗紅色，紫色至深紫色粉末

8）Ex/Em：550/567 nm（inphosphate buffer/SDS pH 7.0）

9）推薦濾光器：Omega-XF108, XF32, Chroma-41002, 31002

10）化學(xué)結(jié)構(gòu)圖：

注意事項(xiàng)

1）熒光染料均存在淬滅問(wèn)題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

2）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用方法

【注意】以下使用方法僅用作參考，可根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)條件做出調(diào)整。

1. 染色液制備

1）儲(chǔ)存液制備：用DMSO或乙醇配置濃度1～5 mM的儲(chǔ)存液。例如，取5mg DiI（Mw：933.87g/mol）溶于1.07ml無(wú)水DMSO中，充分溶解，即得到5mM的儲(chǔ)存液?！咀⒁狻课词褂玫膬?chǔ)存液分裝儲(chǔ)存在-20℃，避免反復(fù)凍融。

2）工作液制備：用合適的緩沖液（如：無(wú)血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS）稀釋儲(chǔ)存液，調(diào)整到1～5 μM的工作濃度?！咀⒁狻抗ぷ饕航K濃度需要根據(jù)不同細(xì)胞系和實(shí)驗(yàn)體系來(lái)優(yōu)化。建議從推薦濃度開(kāi)始，以10倍范圍為區(qū)間進(jìn)行有濃度的摸索。

2. 懸浮細(xì)胞染色

1）加入適當(dāng)體積的染色工作液重懸細(xì)胞，使其密度為1×106/mL。

2）37℃孵育細(xì)胞2～20min，不同的細(xì)胞家培養(yǎng)時(shí)間不同?？梢?0min作為起始孵育時(shí)間，之后優(yōu)化以保證得到均一化的標(biāo)記結(jié)果。

3）孵育結(jié)束，按1000～1500 rpm離心5min。

4）去除上清液，之后輕柔加入37℃預(yù)熱的生長(zhǎng)培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

5）再重復(fù)3），4）步驟兩次。

3. 貼壁細(xì)胞染色

4. 顯微鏡檢測(cè)

1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS濾光器的選擇參見(jiàn)下表：

5. 流式細(xì)胞儀檢測(cè)

經(jīng)DiO，DiI，DiD和DiR染色的細(xì)胞分別用流式細(xì)胞儀的FL1，F(xiàn)L2，F(xiàn)L3或FL4通道檢測(cè)。

— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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DiI （DiIC18（3））細(xì)胞膜橙紅色熒光探針

DiI （DiIC18（3））細(xì)胞膜橙紅色熒光探針