MX2201-Polybrene 聚凝胺 10mg/ml是一種廣泛應(yīng)用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和病毒傳染的聚離子,其化學(xué)名稱為聚凝胺。它能夠通過(guò)中和細(xì)胞表面電荷來(lái)增加病毒或質(zhì)粒DNA與靶細(xì)胞的結(jié)合力,提高載體的轉(zhuǎn)染效率。
MX2201-Polybrene 聚凝胺 10mg/ml的使用方法如下:
1.制備Polybrene溶液:根據(jù)實(shí)驗(yàn)所需濃度,將Polybrene粉末加入適量的無(wú)菌去離子水中,并充分溶解。
2.細(xì)胞培養(yǎng):根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要,選擇合適的培養(yǎng)基和細(xì)胞株,并確保細(xì)胞處于生長(zhǎng)狀態(tài)。
3.細(xì)胞計(jì)數(shù)和處理:在培養(yǎng)離心機(jī)中離心所需的細(xì)胞數(shù)量,將培養(yǎng)基抽取掉,并用預(yù)先冷卻的去離子水洗滌細(xì)胞一次,以去除培養(yǎng)基中的殘留藥物和物質(zhì)。
4.添加Polybrene:根據(jù)實(shí)驗(yàn)所需濃度,在洗滌后的細(xì)胞中加入適量的Polybrene溶液,使其均勻分布。
5.轉(zhuǎn)染病毒或質(zhì)粒DNA:在添加Polybrene后,立即加入病毒懸液或質(zhì)粒DNA懸液到細(xì)胞中,并輕輕搖勻,以確保細(xì)胞與載體充分接觸。
6.細(xì)胞孵育:將細(xì)胞培養(yǎng)皿放回培養(yǎng)箱中,以適當(dāng)?shù)臏囟群虲O2濃度繼續(xù)孵育,以便載體進(jìn)入細(xì)胞和表達(dá)相應(yīng)的基因。
7.轉(zhuǎn)染后維護(hù):根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,根據(jù)所需的實(shí)驗(yàn)周期和終點(diǎn)檢測(cè)時(shí)間,添加相應(yīng)的培養(yǎng)基和處理方法來(lái)維護(hù)細(xì)胞,并收集適量的樣品進(jìn)行后續(xù)分析。
8.需要注意的是,Polybrene的濃度和處理時(shí)間會(huì)因?qū)嶒?yàn)?zāi)康暮图?xì)胞類型而有所不同,因此,在使用之前應(yīng)進(jìn)行一系列的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)以確定最佳條件。此外,在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),必須遵循相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)程,以確保個(gè)人和環(huán)境的安全。
總結(jié)起來(lái),MX2201-Polybrene 聚凝胺 10mg/ml的使用方法涉及制備溶液、處理細(xì)胞、添加Polybrene、轉(zhuǎn)染載體和細(xì)胞孵育等步驟。正確的使用Polybrene可以提高病毒轉(zhuǎn)染或質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率,進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和病毒研究的進(jìn)行。