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技術(shù)文章
Celltracker CM-DiI與DiI細胞熒光探針的標(biāo)記效果比較

CM-DiI(改良探針)與DiI(傳統(tǒng)探針)在透化和非透化處理樣本的效果比較:【來自文獻Staffend NA, et al. DiOlistic labeling of neurons in tissue slices: a qualitative and quantitative analysis of methodological variations.Front Neuroanat. 2011 Mar 1;5:14.】

1、未透化組織DiI&CM-DiI標(biāo)記完整性的比較

結(jié)果顯示【見圖1&圖2】:兩種熒光探針(DiI和CM-DiI)標(biāo)記組織的全細胞檢測顯示,不管是即刻觀察,還是2周后觀察,染料完整性和圖片質(zhì)量都保持完整。對于樹突狀片段的結(jié)果染色結(jié)果一致。另外,通過分析樹突段的突棘密度來調(diào)查不同時間周期下染色穩(wěn)定性和完整性。對于DiI標(biāo)記的樹突段,不會時間段染色幾乎無差異。然而,CM-DiI標(biāo)記的樹突段,突棘密度封片2周后明顯增強。

     

圖1(左). 非透化熒光染色組織的全細胞檢測。A)DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測;B)DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測;C)CM-DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測;D)CM-DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測;

圖2(右). 非透化熒光染色組織的樹突片段檢測。A)DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測;B)DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測;C)CM-DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測;D)CM-DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測;

 

2、透化組織DiI&CM-DiI標(biāo)記完整性的比較

結(jié)果顯示【見圖3&圖4】:兩種熒光探針(DiI和CM-DiI)標(biāo)記組織封片后即刻檢測,不論是全細胞還是樹突段,結(jié)果都無明顯差異;兩種熒光探針(DiI和CM-DiI)標(biāo)記組織封片2周后檢測,不論是全細胞還是樹突段,CM-DiI標(biāo)記的穩(wěn)定性在熒光信號、光淬滅和zui終圖片質(zhì)量上都強于DiI。

不管是即刻觀察,還是2周后觀察,染料完整性和圖片質(zhì)量都保持完整。對于樹突狀片段的結(jié)果染色結(jié)果一致。另外,通過分析樹突段的突棘密度來調(diào)查不同時間周期下染色穩(wěn)定性和完整性。對于DiI標(biāo)記的樹突段,不會時間段染色幾乎無差異。然而,CM-DiI標(biāo)記的樹突段,突棘密度封片2周后明顯增強。

   

圖3(左). 透化熒光染色組織的全細胞檢測。A)DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測;B)DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測;C)CM-DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測;D)CM-DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測;

圖4(右). 透化熒光染色組織的樹突片段檢測。A)DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測;B)DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測;C)CM-DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測;D)CM-DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測;

 

溫馨提示:對于不經(jīng)透化處理的樣本,只需用傳統(tǒng)的細胞膜熒光探針如DiI染色即可。對于后續(xù)需透化處理的樣本,推薦用改良探針如CM-DiI(貨號:MX4007-50UG)進行染色。

 

產(chǎn)品訂購信息:【現(xiàn)貨提供,懋康生物整理和提供,*】

貨號                   

產(chǎn)品名稱                                                        

Ex/Em (nm)      

規(guī)格              

價格(元)      

MX4007-50UG

Celltracker CM-DiI 活細胞示蹤劑CM-DiI(紅色)

553/570

1×50μg

340.00

MX4007-250UG

Celltracker CM-DiI 活細胞示蹤劑CM-DiI(紅色)

553/570

5×50μg

1360.00

MX4002-10MG

DiI (橙紅色熒光探針)

549/565

10mg

398

 

細胞膜探針光譜和檢測濾片:

熒光探針               

 zui大激發(fā)/zui大發(fā)射波長           

(Ex/Em)

濾光片編號

Omeaga公司                         

    Chroma公司                       

DiI

549/565nm

XF108, XF32

41002, 31002

CM-DiI

553/570nm

XF32

31002

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