CM-DiI(改良探針)與DiI(傳統(tǒng)探針)在透化和非透化處理樣本的效果比較:【來自文獻Staffend NA, et al. DiOlistic labeling of neurons in tissue slices: a qualitative and quantitative analysis of methodological variations.Front Neuroanat. 2011 Mar 1;5:14.】
1、未透化組織DiI&CM-DiI標(biāo)記完整性的比較
結(jié)果顯示【見圖1&圖2】:兩種熒光探針(DiI和CM-DiI)標(biāo)記組織的全細胞檢測顯示,不管是即刻觀察,還是2周后觀察,染料完整性和圖片質(zhì)量都保持完整。對于樹突狀片段的結(jié)果染色結(jié)果一致。另外,通過分析樹突段的突棘密度來調(diào)查不同時間周期下染色穩(wěn)定性和完整性。對于DiI標(biāo)記的樹突段,不會時間段染色幾乎無差異。然而,CM-DiI標(biāo)記的樹突段,突棘密度封片2周后明顯增強。
圖1(左). 非透化熒光染色組織的全細胞檢測。A)DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測;B)DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測;C)CM-DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測;D)CM-DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測;
圖2(右). 非透化熒光染色組織的樹突片段檢測。A)DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測;B)DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測;C)CM-DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測;D)CM-DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測;
2、透化組織DiI&CM-DiI標(biāo)記完整性的比較
結(jié)果顯示【見圖3&圖4】:兩種熒光探針(DiI和CM-DiI)標(biāo)記組織封片后即刻檢測,不論是全細胞還是樹突段,結(jié)果都無明顯差異;兩種熒光探針(DiI和CM-DiI)標(biāo)記組織封片2周后檢測,不論是全細胞還是樹突段,CM-DiI標(biāo)記的穩(wěn)定性在熒光信號、光淬滅和zui終圖片質(zhì)量上都強于DiI。
不管是即刻觀察,還是2周后觀察,染料完整性和圖片質(zhì)量都保持完整。對于樹突狀片段的結(jié)果染色結(jié)果一致。另外,通過分析樹突段的突棘密度來調(diào)查不同時間周期下染色穩(wěn)定性和完整性。對于DiI標(biāo)記的樹突段,不會時間段染色幾乎無差異。然而,CM-DiI標(biāo)記的樹突段,突棘密度封片2周后明顯增強。
圖3(左). 透化熒光染色組織的全細胞檢測。A)DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測;B)DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測;C)CM-DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測;D)CM-DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測;
圖4(右). 透化熒光染色組織的樹突片段檢測。A)DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測;B)DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測;C)CM-DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測;D)CM-DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測;
溫馨提示:對于不經(jīng)透化處理的樣本,只需用傳統(tǒng)的細胞膜熒光探針如DiI染色即可。對于后續(xù)需透化處理的樣本,推薦用改良探針如CM-DiI(貨號:MX4007-50UG)進行染色。
產(chǎn)品訂購信息:【現(xiàn)貨提供,懋康生物整理和提供,*】
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | Ex/Em (nm) | 規(guī)格 | 價格(元) |
MX4007-50UG | Celltracker CM-DiI 活細胞示蹤劑CM-DiI(紅色) | 553/570 | 1×50μg | 340.00 |
MX4007-250UG | Celltracker CM-DiI 活細胞示蹤劑CM-DiI(紅色) | 553/570 | 5×50μg | 1360.00 |
MX4002-10MG | DiI (橙紅色熒光探針) | 549/565 | 10mg | 398 |
細胞膜探針光譜和檢測濾片:
熒光探針 | zui大激發(fā)/zui大發(fā)射波長 (Ex/Em) | 濾光片編號 | |
Omeaga公司 | Chroma公司 | ||
DiI | 549/565nm | XF108, XF32 | 41002, 31002 |
CM-DiI | 553/570nm | XF32 | 31002 |